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增強Ames試驗試劑盒新升級：助力N-亞硝胺致突變性評價

更新時間：2026-10-26 點擊次數(shù)：77

N-亞硝胺（N-Nitrosamines）雜質(zhì)的致突變性評價是藥物安全性研究中的關注點，其中包括與原料藥結構相關的亞硝胺雜質(zhì)（NDSRIs）。Ames試驗屬于細菌回復突變試驗（Bacterial Reverse Mutation Test），試驗涉及參考包含OECD 471等指導原則/國標。

針對部分亞硝胺在標準條件下檢測靈敏度有限的問題，IPHASE現(xiàn)在推出的增強 Ames 試驗試劑盒能夠圍繞上述研究需求，提供配套菌株及試劑，幫助實驗室減少試驗材料的準備工作。

01 增強Ames試驗試劑盒與標準Ames試驗試劑盒的區(qū)別

標準Ames試驗試劑盒與增強Ames試驗試劑盒是兩款不同產(chǎn)品，應根據(jù)受試物類型及試驗目的選擇下。下表比較標準Ames試驗試劑盒與增強Ames試驗試劑盒：

比較項目	標準Ames試驗試劑盒	增強Ames試驗試劑盒
主要定位	常規(guī)化合物致突變性評價	面向N-亞硝胺類化合物的致突變性評價
菌株組合	TA97a、TA98、TA100、TA1535、WP2 uvrA（pKM101）	TA98、TA100、TA1535、TA1537、WP2 uvrA（pKM101）
S9活化條件	以10%誘導SD大鼠肝S9條件為主	分別采用30%誘導SD大鼠肝 S9與30%誘導金黃地鼠肝S9條件
預孵育步驟	按標準產(chǎn)品說明書執(zhí)行	采用30分鐘預孵育步驟

兩款產(chǎn)品均基于細菌回復突變原理，試驗設計需結合OECD 471及受試物特點。增強體系中的誘導SD大鼠肝S9（Induced SD Rat Liver S9）與誘導金黃地鼠肝S9（Induced Golden Hamster Liver S9，誘導倉鼠肝S9，Induced Hamster Liver S9），應按相應試驗方案分別設置代謝活化條件。

02 增強Ames試驗試劑盒介紹

IPHASE增強Ames試驗試劑盒滿足N-亞硝胺（N-Nitrosamines) 及亞硝胺雜質(zhì)（NDSRIs）的致突變性評價需求，為增強型Ames試驗提供了配套菌株及試劑，包含活化及非活化體系所需菌株、S9混合液、培養(yǎng)基、底物等全套組分。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格
增強Ames試驗試劑盒	360 dishes

應用領域：創(chuàng)新藥早期遺傳毒性初篩、化學品致突變風險評價、化妝品原料體外致突變檢測、CRO批量Ames委托試驗、體外遺傳毒性評價。

IPHASE試劑盒與培養(yǎng)基組合.png

03 亮點與優(yōu)勢

1、IPHASE增強Ames試驗試劑盒采用經(jīng)優(yōu)化的菌株組合（鼠傷寒沙門氏菌 TA98、TA100、TA1535、TA1537及大腸桿菌WP2 uvrA（pKM101）），搭配高活性倉鼠/SD大鼠肝臟S9代謝系統(tǒng)，能高效激活亞硝胺類化合物，提升對低濃度雜質(zhì)的檢出能力。

2、無需科研人員自行篩選菌株、配制代謝系統(tǒng)和優(yōu)化反應參數(shù)，試劑盒開箱即可使用，大幅縮短試驗準備時間，省時省力，提升檢測效率。

3、試劑盒內(nèi)誘導SD大鼠肝S9與誘導金黃地鼠肝S9組分經(jīng)特殊誘導處理，強化對亞硝胺的代謝激活能力，匹配亞硝胺雜質(zhì)檢測的特殊需求，比通用型試劑盒更具針對性。

4、試劑盒配套誘導SD大鼠肝S9與誘導金黃地鼠肝S9，為N-亞硝胺類化合物的致突變性評價提供外源代謝活化體系。根據(jù)受試物溶解性及試驗要求，可選擇水、甲醇等適配溶劑，避免有機試劑對CYP 450酶活性的抑制。同時，控制有機溶劑在預孵育體系中的用量，以減少對代謝活化的干擾。具體S9使用比例、溶劑選擇及操作條件按產(chǎn)品說明書執(zhí)行。

總結：保留原有試劑盒菌株靈敏度、突變檢出能力不變；通過規(guī)格拆分調(diào)整，兼顧小規(guī)模初篩與高通量安評項目；減少試劑浪費，降低實驗成本，保證Ames試驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定可靠。

04 技術原理

細菌回復突變試驗（Bacterial Reverse Mutation Test）通過觀察受試物是否增加回復突變菌落數(shù)，評價其致突變潛力。OECD 471/國標等準則對菌株、劑量、代謝活化和對照設置等提出建議，具體結果判斷還需結合劑量反應及試驗有效性。

部分受試物需經(jīng)代謝活化后才能產(chǎn)生致突變作用，因此試驗需同時考慮有、無代謝活化的條件。增強型Ames沿用細菌回復突變的基本原理，重點優(yōu)化對部分 N-亞硝胺類化合物的試驗條件。

關鍵質(zhì)控指標：菌株表型驗證、陽性對照回復突變率、S9代謝活化活性、試劑盒有效期、不同規(guī)格可檢測樣本數(shù)量。

Ames公眾號圖片1.png

05 增強Ames試驗試劑盒的陽性對照配置

以下為IPHASE增強Ames試驗試劑盒的+S9與-S9陽性誘導劑設置。其中劑量、溶劑及適用S9條件按說明書執(zhí)行，完整對照設置需結合受試物與試驗方法確定：

FAQ

1.增強型Ames 能測定亞硝胺雜質(zhì)含量嗎？

增強型Ames試驗（Enhanced Ames test）屬于細菌回復突變試驗（Bacterial Reverse Mutation Test），用于評價N-亞硝胺（N-Nitrosamines）及亞硝胺雜質(zhì)（NDSRIs）等受試物的致突變潛力，不用于測定雜質(zhì)含量。雜質(zhì)定量通常需要經(jīng)驗證的色譜與質(zhì)譜等分析方法。

2.標準Ames試驗試劑盒與增強Ames試驗試劑盒的結果能直接比較嗎？

兩者的基本評價原理相同，但菌株、S9來源及比例、預孵育條件等可能不同。結果比較需結合具體試驗設計、劑量設置、溶劑及對照有效性進行，不能僅依據(jù)試劑盒名稱直接判斷數(shù)據(jù)等同。

3.360 dishes規(guī)格如何安排樣本量？

360 dishes為按培養(yǎng)皿計的試劑用量規(guī)格。本產(chǎn)品提供360 dishes規(guī)格，可供1個樣品完成包含溶劑對照、陽性對照、未處理對照及5個劑量組在內(nèi)的1次正式試驗。

4.S9組分如何保存？

本試劑盒S9組分按產(chǎn)品要求于?90℃至?60℃保存，并以對應組分標簽和說明書為準。應按單次試驗用量安排取用，避免同一份S9反復凍融。能否分裝及解凍后如何使用，需遵循說明書要求。

5. 需要準備哪些儀器與耗材？

常用設備包括電子天平、恒溫培養(yǎng)箱、無菌操作設備、水浴鍋及移液器；耗材包括無菌培養(yǎng)容器、離心管、90 mm培養(yǎng)皿及吸頭。具體配置以說明書為準，詳情可聯(lián)系IPHASE獲取配套資料。

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